【通用名稱】DNA/RNA病毒提取試劑（磁珠法）預分裝

【英文名稱】RNA＆DNA Extraction Kit

【包裝規(guī)格】16T/板×6板  ；96T/盒（預封裝）

【預期用途】本試劑盒從血清、血漿、唾液、拭子等樣本中提取、分離RNA＆DNA，其產(chǎn)物用于后續(xù)的PCR擴增檢測。

【實驗原理】本試劑盒采用具有分離作用的磁珠和獨特的緩沖液系統(tǒng)，在特定的鹽離子濃度和pH值條件下，磁珠吸附RNA＆DNA，當條件改變時，磁珠釋放RNA＆DNA，達到快速分離純化RNA＆DNA的目的。

【主要組成成分】

【儲存條件及有效期】

【適用儀器】核酸提取儀

【樣品要求】

1. 唾液樣本，10000rpm離心1min,轉(zhuǎn)移上清進行DNA&RNA提取。

2. 血清、血漿、漱口液、胸水、腹水、腦脊液、尿液標本可以直接進行DNA&RNA抽提。

3. 鼻腔和口腔拭子在PBS或TE溶液中來回攪拌渦旋2～3min，收集上清進行DNA&RNA提取。

【使用方法】

1. 預封裝深孔板準備及加樣

1.1從試劑盒中取出真空包裝的預封裝試劑板，顛倒混勻數(shù)次使磁珠重懸，去掉真空包裝。輕甩96孔板，使試劑和磁珠均集中到96孔板中（也可以使用96孔板離心機，500rpm/min短暫離心），使用前小心撕去鋁箔封口膜，避免96孔板震動，防止液體濺出。

1.2 在96孔板的第（1、2）、（7、8）列中各加入200μl樣本,補加20μl蛋白酶K。其中1、2為一個樣品共400μl，7、8 為一個樣品共400μl，雙孔裂解結(jié)合。

2. 核酸提取儀運動參數(shù)設置

2.1 打開儀器后，按照下表設置提取步驟，名稱保存為Double_RNA_DNA_Virus：

2.2 打開核酸提取儀上的操作程序按鈕,找到程序<Double_RNA_DNA_Virus>，運行程序。

2.3 自動化程序結(jié)束后，將第6、12列的洗脫液轉(zhuǎn)移至干凈的無核酸酶的離心管中。

【檢驗方法的局限性】

本試劑盒適用于提取血清、血漿、全血、菌液、拭子類樣本，組織類樣本不適用于本試劑盒；標準情況下，純化的RNA其OD260/280比值在1.9和2.1之間。但是，當RNA濃度低于20 ng/μL時，偶爾發(fā)現(xiàn)該比值會偏離預期。 

【檢驗結(jié)果的判定】

DNA純度：OD260/OD280≈1.7～2.0 (>2.0，表明有RNA污染；<1.7，表明有蛋白質(zhì)、酚等污染）。

【產(chǎn)品性能指標】

1. 本產(chǎn)品批內(nèi)、批間差異＜5%。

2. 利用儀器提取時，可同時提取1-32個樣本，結(jié)果穩(wěn)定且重復性好。

【注意事項】

請務必在使用該試劑盒之前閱讀此注意事項。

a) 本試劑盒提取靶標為病毒DNA/RNA，操作過程要特別注意防止RNase對RNA的降解，所有使用的器皿、加樣器等均應為專用，離心管、槍頭等一次性耗材需進行高壓滅菌。操作人員應戴無粉手套、口罩等。

b) 本試劑盒內(nèi)-20℃保存的試劑，需充分融化后進行短暫離心，使管壁及管蓋上液體離心至管底。

c) 使用前請詳細閱讀使用說明，嚴格按照使用說明書操作，臨床樣本等需在超凈臺或生物安全柜中進行。

d) 試劑盒內(nèi)的Proteinase K應避免反復凍融。

e) 配合PF32A磁珠核酸提取儀使用前，需對核酸提取儀進行紫外消毒。實驗完畢后，用75%乙醇擦拭提取儀內(nèi)部并進行紫外消毒15分鐘。

f) 洗脫一步可能會存在磁珠殘留，吸取樣品進行后續(xù)操作時應盡量避免吸入磁珠。

g) 不同批號的試劑若無特殊說明，請勿混合使用，并保證在有效期內(nèi)使用該試劑盒。

h) 妥善處置所有樣本及試劑材料，徹底清洗并消毒所有操作臺面。

【參考文獻】

1、Boom, R., C.J.A. Sol, M.M.M. Salimans, C.L. Jansen, P.M.E.W. Dillen, and J. van der Noordaa. 1990. Rapid and simple method for purification of nucleic acids. J. Clin. Microbiol. 28:495–503.

2、Chomczynski, P. and N. Sacchi. 1987. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanatephenol-chloroform extraction.Anal.Biochem. 162:156-159.